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用30升发酵罐研究了内皮细胞抑制素(EDN)酵母工程菌P.pastoris GS115(pPIC9K-EDN)的高密度发酵工艺,摸索出发酵培养基,pH,诱导时间等对菌体生长和基因表达的影响.根据所确定的最适条件进行发酵,通过补料和甲醇诱导48h后,工程菌GS115(pPIC9K—EDN)生物量的A600值达到250,分泌量为150mg/L,发酵液经Streamline SP,Sepharose SPFF离子交换柱和Sepharose-Heparin Hi Trap亲和柱纯化,产物纯度迭97%以上,回收率为