【摘 要】
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目的 探究萝藦果壳多糖(MJP-1\')诱导人肺癌A549细胞凋亡的作用.方法 采用CCK8法检测萝藦果壳多糖对A549细胞活力的影响;采用比色法检测A549细胞内乳酸脱氢酶的释放量变化情况;通过TUNEL实验探究萝藦果壳多糖对A549细胞凋亡的影响;通过JC-1荧光探针探究萝藦果壳多糖对A549细胞线粒体膜电位的影响;通过蛋白质分子印迹法探究萝藦果壳多糖作用后A549细胞凋亡相关蛋白表达的变化.结果 CCK8法显示萝藦果壳多糖抑制A549细胞的增殖,并呈剂量依赖趋势(125 μg/ml组:t=3.0
【机 构】
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锦州医科大学药学院,辽宁锦州121000;锦州医科大学附属第一医院,辽宁锦州121000
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目的 探究萝藦果壳多糖(MJP-1\')诱导人肺癌A549细胞凋亡的作用.方法 采用CCK8法检测萝藦果壳多糖对A549细胞活力的影响;采用比色法检测A549细胞内乳酸脱氢酶的释放量变化情况;通过TUNEL实验探究萝藦果壳多糖对A549细胞凋亡的影响;通过JC-1荧光探针探究萝藦果壳多糖对A549细胞线粒体膜电位的影响;通过蛋白质分子印迹法探究萝藦果壳多糖作用后A549细胞凋亡相关蛋白表达的变化.结果 CCK8法显示萝藦果壳多糖抑制A549细胞的增殖,并呈剂量依赖趋势(125 μg/ml组:t=3.092,P=0.015;250 μg/ml组:t=3.929,P=0.004;500 μg/ml组:t=5.626,P＜0.001;1000 μg/ml组:t=7.512,P＜0.001;2000 μg/ml组:t=9.677,P＜0.001;4000 μg/ml组:t=12.290,P＜0.001;8000 μg/ml组:t=16.000,P＜0.001);比色法显示A549细胞乳酸脱氢酶释放量增加(2 mg/nl组:t=8.233,P=0.001;4mg/ml组:t=12.640,P＜0.001;8mg/ml组:t=27.530,P＜0.001);TUNEL实验显示萝藦果壳多糖可促进A549细胞凋亡(2mg/ml组:t=7.803,P＜0.001;4mg/ml组:t=12.460,P＜0.001;8mg/m[组:t=39.340,P＜0.001);JC-1探针实验结果显示萝藦果壳多糖导致A549细胞线粒体膜电位降低(2mg/ml组:t=24.120,P＜0.001;4mg/ml组:t=28.530,P＜0.001;8mg/ml组:t=31.600,P＜0.001);蛋白质分子印迹法结果显示萝藦果壳多糖可以下调Bcl-2蛋白表达(2 mg/ml组:t=3.790,P=0.019;4 mg/ml组:t=6.598,P=0.003;8 mg/ml组:t=12.840,P＜0.001),并使Bax、cleaved-caspase-3蛋白表达增加(Bax组:2 mg/ml组:t=17.280,P＜0.001;4 mg/ml组:t=36.040,P＜0.001;8 mg/ml组:t=22.520,P＜0.001;cleaved-caspase-3组:2mg/ml组:t=6.487,P=0.003;4mg/ml组:t=9.326,P＜0.001;8mg/ml组:t=22.380,P＜0.001).结论 本研究发现萝藦果壳多糖可以诱导人肺癌A549细胞凋亡,为进一步开发利用萝藦果壳多糖奠定了基础.
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