肠炎沙门菌Ⅰ型菌毛主要亚单位FimA原核表达及纯化

来源 :中国动物传染病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ws1984003

【摘要】

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为探讨肠炎沙门菌非编码小RNA(non-coding small RNA)IsrE在转录后水平是否参与对fimA的调控作用,在大肠杆菌中构建并表达FimA重组蛋白,并对其培养条件进行优化,制备高纯度Fi

【作者】

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王勇祥孟霞段进坤周明旭陶洁杨溢朱国强

【机构】

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扬州大学兽医学院,江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

【出处】

：

中国动物传染病学报

【发表日期】

：

2014年6期

【关键词】

：

肠炎沙门菌非编码sRNA ISRE FimA 原核表达 Salmonella enteritidis non-coding small RNA IsrE

【基金项目】

：

国家自然科学基金(31101826,31270171,31101833),国家科技支撑计划(2012BAK17B10),教育部创新团队(IRT0978),江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD),江苏省自然科学基金(BK2012265,BK2011430),扬州市农业科技攻关计划项目(YZ2011066)

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为探讨肠炎沙门菌非编码小RNA(non-coding small RNA)IsrE在转录后水平是否参与对fimA的调控作用,在大肠杆菌中构建并表达FimA重组蛋白,并对其培养条件进行优化,制备高纯度FimA重组蛋白。利用原核表达载体p ET-28a(+)构建出能表达fimA的重组质粒,并分别对IPTG浓度、诱导温度和诱导时间等条件进行优化,以提高目的蛋白的产量和增大其可溶性,最后经Ni-NTA亲和层析分离纯化FimA重组蛋白。通过酶切、测序和Western blot鉴定分析,成功构建并表达肠炎沙门菌I型菌

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