探讨高雄激素和程序性细胞凋亡因子4(PDCD4)在人颗粒细胞凋亡中的作用。
方法在人卵巢颗粒细胞系KGN中转染PDCD4表达载体，荧光定量PCR的方法检测过表达前后PDCD4的表达情况，应用流式细胞仪技术和Annexin V染色检测PDCD4过表达对KGN细胞凋亡的影响；应用不同浓度梯度的睾酮(0、10-7 mol/L、10-6 mol/L、10-5 mol/L)处理KGN细胞，分别于24 h和48 h后应用实时定量PCR和Western blotting的方法检测不同浓度睾酮处理后颗粒细胞中PDCD4的表达水平，通过流式细胞仪技术检测48 h后不同浓度梯度的睾酮对颗粒细胞凋亡的影响。应用PDCD4小干扰RNA在高浓度睾酮(10-5 mol/L)处理的KGN细胞中敲低PDCD4的表达，应用流式细胞仪技术检测PDCD4的表达敲低对高雄激素诱导的细胞凋亡的影响。
结果PDCD4在人卵巢颗粒细胞系KGN细胞中过表达后，Annexin V-PE染色和流式细胞仪检测结果显示KGN细胞凋亡数显著增加(P=0.014)。不同睾酮浓度处理KGN细胞，与NC组比，10-5 mol/L组和10-6 mol/L组PDCD4基因表达水平均上调(24 h：P=0.035，P=0.038；48 h：P=0.029，P=0.009)；PDCD4蛋白水平表达升高。高浓度的睾酮(10-6 mol/L和10-5 mol/L)处理KGN细胞48 h后，颗粒细胞凋亡显著增加(10-6 mol/L组与NC组比较P=0.036；10-5 mol/L组与NC组比较P=0.028)，差异具有统计学意义。在10-5 mol/L浓度睾酮处理的KGN细胞中敲低PDCD4的表达后，与未敲低组比，细胞凋亡率显著降低(P=0.038)。
结论PDCD4能促进人卵巢颗粒细胞凋亡，高浓度睾酮能诱导颗粒细胞凋亡和上调颗粒细胞中PDCD4的表达水平，其诱导颗粒细胞凋亡的机制可能与PDCD4介导的凋亡通路有关。