【摘 要】
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目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-10b对入胰腺癌细胞AsPC-1细胞(AsPC-1)增殖凋亡的影响.方法 重组真核表达载体pPG-CMV-EGFP-miR-10b(实验组)及空载体(对照组)转染AsPC-1细胞株.
【机 构】
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福建医科大学附属第一医院肝胆胰外科, 福州,350005恩施州中心医院外三科;
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目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-10b对入胰腺癌细胞AsPC-1细胞(AsPC-1)增殖凋亡的影响.方法 重组真核表达载体pPG-CMV-EGFP-miR-10b(实验组)及空载体(对照组)转染AsPC-1细胞株.实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和荧光显微镜检测载体瞬时表达的效率;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞生长曲线;流式细胞仪检测不同组间细胞的凋亡;Western blot检测细胞B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白家族促凋亡调节蛋白(Bim)、髓样细胞白血病-1(MCL-1)蛋白的表达.结果 与对照组(0.002 529±0.000 339)比较,实验组miR-10b表达量(0.020 500±0.007700)增加10倍,差异有统计学意义(P＜0.05).细胞生长曲线提示,实验组细胞增殖活性较对照组增高24％,差异有统计学意义(P＜0.05);实验组细胞凋亡率为3.0％,对照组为10.1％,差异有统计学意义(P＜0.05);实验组细胞Bim蛋白的相对表达水平(0.256 ±0.012)低于对照组(0.652±0.042),差异有统计学意义(P＜0.05);实验组细胞MCL-t蛋白的相对表达水平(0.515±0.025)高于对照组(0.154 ±0.068),差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 miR-10b过表达可调控胰腺癌细胞Bim、MCL-1蛋白的表达,促进细胞增殖,抑制凋亡.
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