【摘 要】
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[目的]探讨基因间的长链非编码RNA(long intergenic non-coding RNA,LincRNA)-p21抑制食管癌细胞增殖的调控及机制。[方法]应用实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)技术,检
【机 构】
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东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金(编号:81573191,81273123)
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[目的]探讨基因间的长链非编码RNA(long intergenic non-coding RNA,LincRNA)-p21抑制食管癌细胞增殖的调控及机制。[方法]应用实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)技术,检测LincRNA-p21在2株食管癌细胞(EC109和EC9706)与1株永生化食管上皮细胞(Het-1A)以及64例食管癌组织与癌旁组织中的表达情况。携带LincRNA-p21基因全长的慢病毒成功转染食管癌EC109后,通过流式细胞术检测食管癌细胞EC109的周期分布,Ed U染色法分析EC109的增殖情况。同时,采用RT-qPCR和Western blot技术分别检测LincRNA-p21下游基因p21的mRNA水平和蛋白表达水平,以及cyclin D蛋白水平。[结果]EC109和EC9706中LincRNA-p21水平分别为Het-1A的18%和32%(P<0.05);p21的mRNA水平分别为Het-1A的42%和48%。以EC109为靶细胞进行慢病毒转染后,LincRNA-p21相对表达量增加约14 860倍(P<0.05),p21的mRNA上调约1.83倍(P<0.05)。细胞周期分布结果显示,LincRNA-p21转染组其G1期细胞增加,S期和G2期细胞减少(P<0.05),增殖指数(40.4%)低于阴性对照(48.2%)(P<0.05)。Ed U增殖分析结果显示上调LincRNA-p21后,细胞增值率明显降低。Western blot结果显示过表达LincRNA-p21下调cyclin D蛋白水平。
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