SD大鼠维生素D受体真核过表达载体构建及功能分析

来源 :生物技术 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rwuinthe3924
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
[目的]构建SD大鼠维生素D受体真核过表达载体并将其在癌细胞中表达及分析不同癌细胞VDR表达的差异性。[方法]通过基因工程方法从p UC18-rat-VDR质粒载体上通过PCR扩增得到了大鼠VDR片段全长,并构建CD513-VDR-EGFP真核超表达载体;经常规PCR、XbaⅠ和Bam HⅠ双酶切及测序鉴定后提取重组质粒CD513-VDR-EGFP并进行细胞转染。利用Western Blot和q PCR方法分析蛋白和基因表达差异。[结果]荧光显微镜下可见单独转染CD513-EGFP和单独转染CD513-VDR-EGFP的293T细胞和He La细胞表达强烈的绿色荧光蛋白,并检测到蛋白及基因表达差异性的存在。[结论]成功构建重组质粒CD513-VDR-EGFP并在目的细胞中过表达(P<0.01),本底水平表达的VDR在He La细胞中的表达略高于293T细胞(P>0.05)。
其他文献
近年来,我国首饰行业发展迅速,首饰的普及率不断增长。随着科技水平的不断进步和人们审美水平的不断提高,生活趣味性也在不断扩展,传统商业款首饰已经很难满足人们的消费需求
随着中国经济的快速发展和市场化水平的不断深入,同业之间的竞争日益激烈。在不断提高的信息化手段、技术能力和管理水平的作用下,为了能够击败竞争对手,各企业相互效仿和追
分析了16MnR+904L复合钢及16MnR+904L复合钢与904L钢板对接焊的焊接特点,确定了其适当的焊接材料和坡口型式以及合理的焊接工艺,并应用于实际产品的焊接,取得了良好的效果。
针对现有复合地基固结理论仍不能考虑实际工程中存在的初始孔压非均布情况的不足,采用解析方法对散体材料桩复合地基进行深入研究,给出了考虑初始孔压非均布的散体材料桩复合
目的观察参麦注射液(SM)对缺氧型心搏骤停(CA)豚鼠模型心肺复苏(CPR)成功后自主循环的影响.方法将豚鼠随机分为SM组和生理盐水(NS)组,腹腔注射SM、NS30min后,采用夹闭气管窒
随着电动汽车的广泛使用,电池管理系统在其中的作用越来越凸现出来。作为电池管理系统的重要部分,动力电池的荷电状态(State of Charge,SOC)的估计受多种因素的影响,这使得其
串补电容及其保护装置MOV的应用给常规的故障定位与选相方法带来了困难.然而,串补输电线路发生故障后以及故障期间MOV导通时将产生高频暂态电流行波,故障相和非故障相的暂态
西方女权主义从一股弱小的政治运动逐渐发展成一种重要的意识形态,从而日益引起人们的关注。它对西方政治、文化思潮和政府决策有着重要的影响。传统社会主义理论很重视对妇