【摘 要】
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介绍了利用Pro-Q Diamond/SYPRO荧光染料分析磷酸化蛋白在芜菁根皮中的表达。比较了酚法、SDS法、Tris-HCl法、TCA-丙酮法、裂解液直接裂解法和改良的酚2h沉淀法所提取芜菁根
【机 构】
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东北林业大学生命科学学院,东京大学大学院农学生命研究科,
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介绍了利用Pro-Q Diamond/SYPRO荧光染料分析磷酸化蛋白在芜菁根皮中的表达。比较了酚法、SDS法、Tris-HCl法、TCA-丙酮法、裂解液直接裂解法和改良的酚2h沉淀法所提取芜菁根皮中总蛋白的浓度和纯度。最后用改良酚法提取了芜菁的总蛋白,双相电泳分离后,用Pro-Q Diamond/SYPRO荧光染料染色对磷酸化蛋白进行染色分析,并对磷酸化蛋白点做了质谱鉴定。
The use of Pro-Q Diamond / SYPRO fluorescent dye to analyze the expression of phosphorylated protein in the root bark of turnip is described. The concentration and purity of total protein in the root bark of turnip extracted by phenol method, SDS method, Tris-HCl method, TCA-acetone method, lysate direct lysis method and modified phenol 2h precipitation method were compared. Finally, the total protein of turnip was extracted by the modified phenol method. After separation by two-phase electrophoresis, the phosphorylated protein was stained with Pro-Q Diamond / SYPRO fluorescent dye, and the phosphorylated protein spots were identified by mass spectrometry.
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