靶向抑制人木糖基转移酶-I基因的shRNA真核表达载体的构建

来源 :华西口腔医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong545
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目的构建靶向抑制人木糖基转移酶-I(XT-I)基因的短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体,为探讨唾液腺肿瘤性肌上皮细胞合成及分泌蛋白多糖(PG)的研究奠定基础。方法根据GenBank提供的XT—I基因序列,设计短链寡核苷酸,化学合成后经退火形成双链DNA片段,克隆到Pgenesil一1载体中,构建shRNA真核表达载体WJ1-WJ6,行酶切及核酸测序鉴定;将构建的XT—I特异性shRNA表达载体转染体外培养的人唾液腺腺样囊性癌细胞株ACC—M,在荧光倒置显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,流式细胞术检测转
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