【摘 要】
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目的 运用网络药理学并结合动物实验探究喉咽清治疗咽炎的物质基础及作用机制。方法 通过TCMSP（中药系统药理学分析平台）数据库检索喉咽清的化学成分，并通过文献检索补充潜在活性成分，再经TCMSP及SwissTargetPrediction数据库预测成分作用靶点，建立靶点数据；通过GeneCards数据库筛选出抗炎相关靶点；用Cytoscape3.9.0软件构建“化合物-靶点（基因）”网络可视化关系
【基金项目】
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湖南省自然科学基金委员会面上项目（2021JJ30500）：基于NF-κB与Nrf2双信号通路研究新冠防治方“喉咽清”的抗炎作用与物质基础，负责人：欧阳文； 湖南省中医药管理局一般项目（2021060）：基于NF-κB与Nrf2双信号通路的新冠防治方“喉咽清”抗炎作用与物质基础研究，负责人：欧阳文； 湖南省教育厅创业训练项
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目的 运用网络药理学并结合动物实验探究喉咽清治疗咽炎的物质基础及作用机制。方法 通过TCMSP（中药系统药理学分析平台）数据库检索喉咽清的化学成分，并通过文献检索补充潜在活性成分，再经TCMSP及SwissTargetPrediction数据库预测成分作用靶点，建立靶点数据；通过GeneCards数据库筛选出抗炎相关靶点；用Cytoscape3.9.0软件构建“化合物-靶点（基因）”网络可视化关系图；采用STRING数据库对靶点进行蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络分析，使用Cytoscape3.9.0软件中的CytoNCA插件对STRING数据库导出的PPI网络进行degree值算法分析，将degree值排名前30的网络靶点作为喉咽清的抗炎核心靶点，并构建“核心靶点-活性成分”网络图；通过DAVID分析平台进行基因本体（GO）分析和基于京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析，了解喉咽清抗炎的潜在生物过程及其通路；利用Autodock软件进行半柔性分子对接反向验证。在动物实验中，以15%的浓氨水诱导咽炎大鼠模型，经喉咽清灌胃处理后，ELISA法检测大鼠血清一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素1-beta（IL-1β）的表达，HE染色观察大鼠咽部组织病理学变化。结果 从喉咽清中共筛选得到65个活性成分，关键靶点涉及PTGS2、AKT1、MAPK3、STAT3、IL-6、TNF、NFKBIA等。KEGG通路富集结果显示喉咽清主要作用于Pathwaysincancer、HepatitisB、TNFsignalingpathway等信号通路。分子对接结果显示β-蜕皮甾酮、齐墩果酸、山奈酚、竹节参皂苷IVa等核心化合物与关键靶点同时满足空间匹配与能量匹配。动物实验表明，与正常对照组相比，模型对照组大鼠咽部炎性改变明显，血清IL-6、IL-1β水平升高；与模型组相比，地塞米松5mg·kg-1组、喉咽清1.34g·kg-1、2.67g·kg-1组大鼠咽部炎症减轻，地塞米松5mg·kg-1组、喉咽清1.34g·kg-1、2.67g·kg-1组血清IL-6含有量降低（P＜0.05）。结论 喉咽清可能是通过调控肿瘤合成途径、乙型肝炎、肿瘤坏死因子等信号通路，对细胞代谢的多个过程产生影响，抑制炎症因子的表达，发挥抗炎作用。初步推测并验证了喉咽清治疗咽炎的主要靶蛋白与通路，为后续进一步验证喉咽清靶向抗炎提供新思路。
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