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目的优化分离纯化大肠杆菌发酵液中重组水蛭素Ⅲ的工艺并对所纯化产物进行分子鉴定. 方法通过三步纯化步骤,即大孔树脂层析、DEAE纤维素DE52层析和反相高效液相色谱层析,分离纯化发酵液中的重组水蛭素Ⅲ,优化纯化条件.通过SDS-PAGE和分析型反相高效液相色谱对重组水蛭素Ⅲ的纯度进行鉴定.以质谱对重组水蛭素Ⅲ的分子量进行鉴定.通过肽图的测定来鉴定重组水蛭素Ⅲ的结构. 结果通过优化后的分离纯化步骤得到了纯度为95.4786%的纯品,总产率为39%.得到的产物分子量为6 913.32 ± 6.55 D