论文部分内容阅读
目的 探究牛膝、盐牛膝及酒牛膝对肾病综合征模型大鼠的影响及潜在机制。方法 60只雄性SD大鼠,除正常组(6只)外,其余大鼠尾静脉注射阿霉素(4 mg·kg-1),并于7 d后再次尾静脉注射阿霉素(3.5 mg·kg-1),正常组2次均尾静脉注射等剂量生理盐水。第2次尾静脉注射阿霉素7 d后检测反映模型是否复制成功的相关指标,即血清中肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平。将模型复制成功的30只大鼠随机分成5组:模型组、阳性药醋酸泼尼松组(12.5 mg·kg-1)、牛膝组(4 g·kg-1)、盐牛膝组(4 g·kg-1)和酒牛膝组(4 g·kg-1),每组6只,按照上述剂量每天灌胃给药1次,模型组给予等量水,持续2周。HE染色观察大鼠肾脏病理变化;比色法检测血清中Cr、BUN及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物歧化酶(GSH-Px)水平;ELISA法检测血清及肾组织中白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素18(IL-18)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)水平。网络药理学预测牛膝治疗肾病综合征的潜在机制并进行实验验证。Western Blotting法检测肾组织中NF-κB p-p65、NF-κB p65、p-smad3、smad3蛋白表达水平。结果 实验结果显示,模型组血清中Cr、BUN水平与正常组比较明显降低(P<0.01,P<0.05),模型复制成功。牛膝及其炮制品均能不同程度地改善肾组织病理损伤,降低血清中Cr、BUN、MDA水平,升高GSH-Px、SOD水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001);降低血清和肾组织中IL-6、IL-18、TNF-α、IFN-γ水平,升高IL-2水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。网络药理学发现牛膝治疗肾病综合征可能主要通过TNF、转录因子AP(JUN)、IL-6等9个靶基因以及NF-κB、造血细胞调控、TGF-β信号通路等多条通路发挥作用。验证实验表明,与模型组比较,牛膝及其炮制品均能降低肾组织中NF-κB p-p65/NF-κB p65、p-smad3/smad3蛋白比值(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论 牛膝及其2种炮制品对阿霉素肾病综合征模型大鼠均有不同程度的保护作用,且盐牛膝和酒牛膝作用优于牛膝,可能通过TNF及IL-6等靶点、NF-κB及TGF-β等信号通路对肾病综合征发挥作用。