【摘 要】
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目的:研究Zonadhesin蛋白D4 domain在受精过程中的作用.方法:将小鼠Zonadhesin D4结构域分亚结构域(VWD subdomain及余C-端片段)克隆,在E. coli诱导表达目的蛋白,将纯化重组
【机 构】
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上海交通大学医学院组织学与胚胎学教研室,安徽医科大学组织学与胚胎学教研室
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目的:研究Zonadhesin蛋白D4 domain在受精过程中的作用.方法:将小鼠Zonadhesin D4结构域分亚结构域(VWD subdomain及余C-端片段)克隆,在E. coli诱导表达目的蛋白,将纯化重组蛋白片段为抗原,制备兔抗鼠D4结构域多克隆抗体,免疫印迹法、精子间接免疫荧光染色鉴定多克隆抗体的特异性及D4结构域在小鼠精子表达.用多抗处理获能小鼠精子,然后与小鼠超排卵子进行体外受精及精子-透明带结合实验.结果:D4亚结构域成功克隆表达,制备了能特异性识别精子天然Zonadhesin D4的多克隆抗体,多抗处理组精子与卵透明带结合数与对照组差异无统计学意义,卵子的受精率也无明显差异.结论:抗重组Zonadhesin D4结构域的多抗对小鼠体外受精无抑制作用.
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