兔抗人β2糖蛋白Ⅰ多克隆抗体的制备与鉴定

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目的制备兔抗人β2糖蛋白Ⅰ多克隆抗体,并鉴定抗体的特异性及功能活性。方法以纯化的人血浆p2糖蛋白Ⅰ(β2-GPI)免疫新西兰大白兔,获得抗血清;利用ProteinA及β2-GPI亲和层析柱纯化血清中总IgG和抗β2-GPI多克隆抗体;用免疫双向扩散试验(IDD)、ELISA和western-blot等方法鉴定抗体。结果IDD及ELISA鉴定抗体效价分别达到16和1×10^5;western-blot显示纯化的总IsG和抗β2-GPI抗体与β2-GPI蛋白均有特异反应条带;且抗体与β2-GPI复合
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