【摘 要】
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目的 探讨颗粒蛋白前体(PGRN)对小鼠乳腺癌4T1细胞侵袭和迁移的影响及其机制.方法 采用1 μg/mL PGRN处理乳腺癌4T1细胞24 h,通过TranswellTM侵袭实验检测4T1细胞的侵袭能力
【机 构】
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重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆400016
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目的 探讨颗粒蛋白前体(PGRN)对小鼠乳腺癌4T1细胞侵袭和迁移的影响及其机制.方法 采用1 μg/mL PGRN处理乳腺癌4T1细胞24 h,通过TranswellTM侵袭实验检测4T1细胞的侵袭能力、划痕实验检测细胞的迁移能力,实时荧光定量PCR检测4T1细胞上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的mRNA水平,Western blot法检测4T1细胞E-cadherin、vimentin、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、磷酸化的ERK1/2 (p-ERK1/2)蛋白水平.采用1μg/mL PGRN与ERK1/2信号通路抑制剂U0126(10 μmol/L)同时处理4T1细胞后,前述方法检测4T1细胞侵袭及迁移能力及E-cadherin、vimentin与p-ERK蛋白表达的变化.结果 乳腺癌4T1细胞经PGRN处理后,其侵袭及迁移能力明显增强;E-cadherin表达下降,vimentin表达升高,p-ERK1/2的表达增强;抑制ERK1/2信号通路后,PGRN促进乳腺癌4T1细胞侵袭、迁移及上皮间质转化(EMT)的能力被明显抑制.结论 PGRN可通过促进EMT及激活ERK1/2通路促进乳腺癌4T1细胞的侵袭及迁移.
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