【摘 要】
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目的克隆并表达鉴定淡色库蚊细胞色素P450 (CYP4E2r6) 基因.方法根据昆虫细胞色素P450氨基酸保守序列设计一对简并引物,采用RT-PCR,从淡色库蚊四龄幼虫mRNA中扩增出目的基因
【机 构】
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南京医科大学病原生物学系,南京医科大学病原生物学系
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目的克隆并表达鉴定淡色库蚊细胞色素P450 (CYP4E2r6) 基因.方法根据昆虫细胞色素P450氨基酸保守序列设计一对简并引物,采用RT-PCR,从淡色库蚊四龄幼虫mRNA中扩增出目的基因片段.产物经T-A克隆、测序、比对,在抗性品系高表达的CYP4E2r6亚克隆入原核表达载体pGEX-6P1,在大肠杆菌BL21中进行原核表达,将细菌总蛋白进行SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果 14个阳性克隆中9个为CYP4新序列, 由GenBank登录上网(GenBank/NCBI CB07494
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