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将稀释后的药物加入试管,或加入冷却至45~55℃M-H培养基中,立即在无菌条件下制作系列药物浓度梯度的药敏试验试管(图2)。用无菌生理盐水或M-H肉汤培养基,将菌液配置成106个/mL浓度的菌悬液。在配制好的含药浓度梯度液体培养基试管中加入上述供试致病菌的菌悬液。制备好的药物敏感测试试管放置于培养温度为28℃条件下(注意根据致病菌的特性选择培养适宜温度),培养一定的时间后,再观察试验结果。