人G6PD T279A和T279S两种突变子的体外构建

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目的:构建葡萄糖6磷酸脱氢酶(Glucose 6-phosphate dehydrogenase,G6PD)T279A和T279S两种突变子。方法:以Genbank No X03674为参考序列设计并合成引物、以含G6PD基因的质粒(Philip J Mason博士惠赠)为模板,PCR扩增获得G6PD野生型基因片段,琼脂糖凝胶电泳后回收PCR产物,连接、转化构建克隆质粒pMD18T—G6PD;酶切pMD18T—G6PD质粒、电泳后回收目的基因片段,连接、转化构建含G6PD野生型基因的重组质粒pAL—G6P
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