【摘 要】
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目的 观察转染过表达WW域的氧化还原酶(WWOX)质粒对胆囊癌细胞株GBC-SD迁移、侵袭能力的变化,并探讨其机制.方法 胆囊癌细胞株GBC-SD分为实验组、NEG组、空白对照组,实验组转染WWOX过表达质粒,NEG组转染空载质粒,空白对照组不做处理.采用细胞划痕实验测算各组细胞迁移率,以细胞迁移率表示细胞迁移能力.采用Transwell实验测算各组穿膜细胞数,以穿膜细胞数表示细胞侵袭能力.采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中WWOX、P73、E-cadherin、Vimentin mRNA,采用Wes
【机 构】
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昆明医科大学第二附属医院肝胆胰外科,昆明650000;昆明医科大学第二附属医院肿瘤科;云南省第三人民医院肾病科
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目的 观察转染过表达WW域的氧化还原酶(WWOX)质粒对胆囊癌细胞株GBC-SD迁移、侵袭能力的变化,并探讨其机制.方法 胆囊癌细胞株GBC-SD分为实验组、NEG组、空白对照组,实验组转染WWOX过表达质粒,NEG组转染空载质粒,空白对照组不做处理.采用细胞划痕实验测算各组细胞迁移率,以细胞迁移率表示细胞迁移能力.采用Transwell实验测算各组穿膜细胞数,以穿膜细胞数表示细胞侵袭能力.采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中WWOX、P73、E-cadherin、Vimentin mRNA,采用Western blotting法检测各组细胞中WWOX、P73、E-cadherin、Vimentin蛋白.结果 实验组、NEG组、空白对照组细胞迁移率分别为50.42％ ±3.47％、74.81％ ±1.04％、77.82％±2.71％,其中实验组细胞迁移率与NEG组、空白对照组相比,P均<0.05.实验组、NEG组、空白对照组穿膜细胞数分别为(77.33±8.65)、(173.33±6.18)、(187.33±6.94)个,其中实验组穿膜细胞数与NEG组、空白对照组相比,P均<0.05.实验组WWOX、P73、E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量均高于NEG组和空白对照组(P均<0.05),实验组Vimentin mRNA和蛋白相对表达量均低于NEG组和空白对照组(P均<0.05).结论 转染过表达WWOX质粒的GBC-SD细胞株迁移、侵袭能力降低,其机制可能与P73表达上调进而抑制GBC-SD细胞的上皮-间充质转化过程有关.
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