【摘 要】
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目的:利用Cre-LoxP系统建立可调控的软骨组织条件性敲除成纤维细胞生长因子9(fibroblast growth factor,FGF9)小鼠模型.方法:构建针对小鼠Fgf9基因2号外显子的重组载体,电穿
【机 构】
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上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔医学院正畸科,国家口腔疾病临床医学研究中心,上海市口腔医学重点实验室,上海市口腔医学研究所,上海200011;同济大学口腔医学院·附属口腔医院正畸科教研室,上海
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目的:利用Cre-LoxP系统建立可调控的软骨组织条件性敲除成纤维细胞生长因子9(fibroblast growth factor,FGF9)小鼠模型.方法:构建针对小鼠Fgf9基因2号外显子的重组载体,电穿孔转染胚胎干细胞(ES细胞).选择药物G418和Ganc,筛选阳性ES细胞并进行PCR鉴定.利用显微注射将ES细胞注入C57BL/6J小鼠囊胚,移入假孕小鼠子宫,获得含Neo的flox杂合小鼠.该小鼠去Neo后,与Col Ⅱ-Cre转基因小鼠杂交,并以他莫昔芬诱导,其后代软骨细胞内flox纯合、Cre阳性小鼠的flox区域被敲除.结果:Fgf9基因flox杂合子小鼠无明显异常,可稳定繁殖.该flox小鼠与Col Ⅱ-Cre转基因小鼠交配后,成功建立条件性敲除软骨组织中Fgf9基因小鼠模型.结论:利用Cre-LoxP系统,可成功建立Fgf9基因条件性敲除小鼠模型,为后续研究FGF9在骨软骨发育及骨关节稳态维持中的功能奠定了基础.
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