【摘 要】
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目的通过建立离体血管平滑肌细胞钙化模型，观察成纤维细胞生长因子21(FGF21)对血管钙化的影响，并探讨其机制。方法使用氯化钙和β磷酸甘油诱导离体大鼠主动脉血管平滑肌细胞钙化。将细胞分为对照组(使用常规培养基)、钙化组(使用钙化培养基)、FGF21组(使用钙化培养基和FGF21)、PD166866组[使用钙化培养基、FGF21和成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)抑制剂PD166866]和GW9
【机 构】
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目的通过建立离体血管平滑肌细胞钙化模型，观察成纤维细胞生长因子21(FGF21)对血管钙化的影响，并探讨其机制。
方法使用氯化钙和β磷酸甘油诱导离体大鼠主动脉血管平滑肌细胞钙化。将细胞分为对照组(使用常规培养基)、钙化组(使用钙化培养基)、FGF21组(使用钙化培养基和FGF21)、PD166866组[使用钙化培养基、FGF21和成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)抑制剂PD166866]和GW9962组(使用钙化培养基、FGF21和过氧化物酶体增殖因子受体γ抑制剂GW9662)。通过细胞内钙含量、碱性磷酸酶活性和茜素红染色检测血管平滑肌细胞钙化情况。FGFR1、β-Klotho、骨钙素和平滑肌22α的蛋白含量和mRNA表达水平分别用Western blot和Real-time PCR检测。
结果(1)与对照组比较，钙化组的FGFR1和β-Klotho蛋白水平(P<0.05)和mRNA水平(P<0.01)均较低。(2)与钙化组比较，FGF21组钙含量、碱性磷酸酶活性和骨钙素的表达量较少(P<0.05或0.01)，同时平滑肌22α的蛋白和mRNA水平较高(P均<0.05)。茜素红染色显示，与钙化组比较，FGF21组的红色钙化结节较少。(3)PD166866组与钙化组之间的钙含量、碱性磷酸酶活性和茜素红染色结果差异均无统计学意义(P均>0.05)。(4)GW9662组与钙化组之间的钙含量、碱性磷酸酶活性和茜素红染色结果差异均无统计学意义(P均>0.05)。
结论在大鼠血管平滑肌钙化模型中，FGFR1和β-Klotho的蛋白及mRNA水平下调，降低了FGF21抑制血管平滑肌细胞钙化的作用；FGF21通过过氧化物酶体增殖因子受体γ通路减轻血管钙化。
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