【摘 要】
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目的探讨p38 MAPK对人主动脉平滑肌细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达的影响。方法分别使用药理学抑制剂和siRNA干预细胞。药理学抑制剂试验细胞分为:1正常对照组,平滑肌细胞完全培养基
【机 构】
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山东大学附属济南市中心医院心内科,山东大学附属济南市中心医院保健科,济南大学山东省医学科学院医学与生命科学学院,
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目的探讨p38 MAPK对人主动脉平滑肌细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达的影响。方法分别使用药理学抑制剂和siRNA干预细胞。药理学抑制剂试验细胞分为:1正常对照组,平滑肌细胞完全培养基正常培养;2 DMSO(p38 MAPK抑制剂溶剂)对照组,0.01%DMSO处理;3 p38 MAPK抑制剂组,0.01%p38 MAPK抑制剂(20 mg/m L)处理。基因沉默试验细胞分为:1静态对照组,平滑肌细胞完全培养基正常培养;2阴性对照siRNA组,M ACSfectin试剂转染阴性对照siRNA 48 h;3 p38 M APK siRNA组,M ACSfectin试剂转染p38 M APK siRNA 48 h。采用qRT-PCR法检测Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA表达;采用Western blotting法检测Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达以及p38 MAPK转染效率;荧光显微镜观察siRNA转染效率。结果与正常对照组相比,DMSO对照组细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达无明显变化(P>0.05),p38 MAPK抑制剂组细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05)。与静态对照组相比,阴性对照siRNA组细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达无明显变化(P>0.05),p38 MAPK siRNA组细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论 p38 MAPK信号通路调控人主动脉平滑肌细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原的表达。
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