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温育是ELISA试验中必需的步骤，也是影响ELISA检测结果最为关键的一个因素。ELISA作为一种固相免疫测定，抗原-抗体结合反应在固相载体上进行，必须在一定的温度条件下反应一定的时间才能使液相中的抗原或抗体与固相中的特异性抗体或抗原充分结合。ELISA试验中抗原-抗体结合的合适温度为37℃，但在常规实验中，从室温操作完毕再将微孔板放入37℃恒温箱中时，孔内的温度从室温升至反应平台的37℃需要一定的时间，这样会使抗原-抗体在37℃条件下反应的时间相对缩短，有可能直接影响检测结果。