【摘 要】
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目的建立脐血CD34+干细胞体外诱导树突状细胞(DC)的培养体系,并观察IgE受体和Toll样受体的表达特征及其影响因素。方法无菌条件下常规采集脐血,采用梯度离心试剂和全自动磁性
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目的建立脐血CD34+干细胞体外诱导树突状细胞(DC)的培养体系,并观察IgE受体和Toll样受体的表达特征及其影响因素。方法无菌条件下常规采集脐血,采用梯度离心试剂和全自动磁性活化细胞分选仪(autoMACS)分离CD34+肝细胞并培养,每4天半量更换含有重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和TGF-β的培养基,隔日加入1 ng/ml的人骨髓瘤IgE(myeloma IgE,mIgE)。于培养不同时段收获细胞,利用单克隆抗体和流式细胞术对诱导细胞亚群检测CD1a、CD14、Langerin、FcεRⅠ、FcεRⅡ和TLR的表达。结果体外诱导培养4 d后可观察到典型的树突状细胞,不同质量浓度的TGF-β可影响细胞Langerin、FcεRⅠ和TLR2的表达;Langerin的表达主要限于CD1a+和CD14C+D1a+(DP)细胞亚群,FcεRⅠ和TLR2在不同的细胞亚群均有表达,以CD14+、DP和CD1a+细胞亚群中表达水平较高,不同类型的细胞群不同程度地表达CD1a、Langerin、FcεRⅠ、FcεRⅡ和TLR2。结论利用GM-CSF、TGF-β和mIgE可诱导脐血CD34+干细胞分化为表达FcεRⅠ和TLR2受体的DC,TGF可调节2种受体表达水平。
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