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目的：构建携带多瘤病毒MT癌基因的真核细胞表达载体。方法：从野生型多瘤病毒上取其nt4632至nt1560片段克隆到pUC19上，再将该片段定点插入pEGFP1的HindⅢ和EcoRI位点间，构建携带多瘤病毒MT癌基因的真核表达载体pPyMT-GFP。经线性化，将重组体导入鼠皮肤成纤维细胞中，G418选择培养，得到抗性细胞克隆。结果：构建的pPyMT-GFP质粒在鼠成纤维细胞中有稳定表达。结论：来源于野生型多瘤病毒的PyMT基因在哺乳动物细胞中有稳定表达，其真核表达载体pPyMT-GFP可被进一步用于研究