【摘 要】
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目的:用基因脾内免疫方法制备抗人c-kit单克隆抗体,并通过对抗体生物学特性的初步研究,确定该方法制备抗体的可行性.方法:利用分子克隆方法构建重组质粒pcDNA3.1/c-kit胞外区
【机 构】
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中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院,天津,300020
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目的:用基因脾内免疫方法制备抗人c-kit单克隆抗体,并通过对抗体生物学特性的初步研究,确定该方法制备抗体的可行性.方法:利用分子克隆方法构建重组质粒pcDNA3.1/c-kit胞外区,脾内免疫BALB/c小鼠一次,通过杂交瘤技术制备抗人c-kit单克隆抗体.采用流式细胞术、Western blot方法初步鉴定制备的抗体.结果:目的基因片段c-kit胞外区正确插入质粒pcDNA3.1,重组质粒免疫小鼠后通过杂交瘤技术获得了三株分泌抗人c-kit胞外区的杂交瘤细胞株6C4、2C5和5D5,其亚类均为IsM类,识别不同的抗原表位,其特异性与抗人c-kit抗体一致.结论:可用基因脾内一次免疫法制备抗人c-kit单克隆抗体.
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