【摘 要】
:
利用PCR方法扩增猪细小病毒7型(porcine parvovirus 7,PPV7)的Cap基因,将扩增产物克隆至pGEX-6P-1原核表达载体,构建重组质粒pGEX-6P-1-Cap,并进行测序鉴定。经鉴定正确后的
【机 构】
:
安徽农业大学动物科技学院; 宁波市疾病预防控制中心;
【基金项目】
:
国家重点研发计划(2018YFD0502006);国家自然科学基金(31602063)
论文部分内容阅读
利用PCR方法扩增猪细小病毒7型(porcine parvovirus 7,PPV7)的Cap基因,将扩增产物克隆至pGEX-6P-1原核表达载体,构建重组质粒pGEX-6P-1-Cap,并进行测序鉴定。经鉴定正确后的重组质粒转化至E.coli Rosetta感受态细胞进行IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE和Western-blot进行鉴定。同时使用生物信息学软件预测该基因编码的蛋白的理化性质、二级结构、信号肽和跨膜结构域等。结果表明,成功从病料中扩增到Cap基因并构建获得重组质粒pGEX-6P-1-Cap,诱导表达出大小约为78 ku的Cap蛋白,与预期相符。诱导获得的Cap蛋白能够与GST单抗发生特异性反应,具有良好的反应原性。生物信息学分析结果显示,该蛋白是亲水稳定蛋白,二级结构中以无规则卷曲(c)结构居多,占62.90%,α螺旋(h)、β转角(t)、延伸链(e)分别占11.09%、4.05%、21.96%,无信号肽区域和跨膜结构域,存在62个磷酸化位点,12个B细胞抗原表位,2个CTL表位和3个Th表位。本研究成功表达了PPV7 Cap蛋白并预测其生物学特性,为该蛋白质的生物学功能相关研究提供参考。
其他文献
为解决某公路改扩建工程中遇到的新旧道路结合处差异性沉降问题,论文结合工程实际,对软土地基上新旧道路结合处的差异性沉降原因进行了分析研究,主要由场地类别、附加应力及
近年来随着汽车行业迅速发展,对轻型车转向弯臂这种形状复杂的锻件在尺寸精度、内在和表面质量等方面的要求越来越严格,合理设计转向弯臂成形工艺及模具结构成为解决这些问题
确定核心语素集是语言年代学、语源有界分析和数理谱系分类的必要条件。斯瓦迪士(Swadesh)200基本词汇更是基本词汇中的核心,我们统一称为“核心语素”,而把我们曾经用于比较
综述了喷射沉积技术的原理和特点及其发展的简要过程,双金属材料的传统制备技术及其不足,喷射沉积技术制备双金属板材的基本过程和特点。
目的探讨512例以急性腹痛原因待查入院者的诊断方法。方法选择1994年至2004年我院急诊科以急性腹痛原因待查收治的512例患者的临床资料,分析其常见病因及延迟确诊的原因。结
为研究液化天然气(LNG)作为航空燃料的可行性,对LNG的特点、发展趋势及作为航空燃料存在的问题进行了分析.采用了横向比较的方法,将LNG与新的航空替代燃料和传统航空燃料进行
目的观察针刀及手法治疗环枕筋膜挛缩型颈椎病的疗效及安全性。方法应用针刀及手法治疗,包括针刀松解环枕筋膜;点穴、弹拨筋节、扳颈整复手法为主。结果94例环枕筋膜挛缩型颈
通过对采煤机截割部件进行受力分析,用三维制图软件SolidEdge建立了采煤机截割系统壳体三维模型,并对工况下截割系统壳体进行了仿真分析;针对仿真结果进行了应力分析,并对应
船舶下水施工过程中需要进行拉力的监测工作,拉力值的变化幅度需要在可控制范围之内,拉力数据的及时反馈将有效地提高船舶下水施工过程中的安全系数。传统的人工巡查方式存在数据反馈延迟、数据读取量小、数据记录错误、施工成本增加等问题,并且施工过程中人工巡查具有一定的风险性。本文设计了一种基于ZigBee与NB-IoT新技术下水拉力实时监测系统,通过在牵引点布置拉力数据采集节点,应用ZigBee技术将拉力数据
为了更好的解决环境管理中的实际问题,对未知区域的土壤重金属污染状况进行评估是很有必要的。本研究以重庆江津市吴滩镇为研究区,在该研究区采集耕层土壤样品121个并对重金