人乙型肝炎病毒聚合酶在酿酒酵母中的表达

来源 :辽宁医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aihaiyuguijing
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目的尝试在酵母中表达人乙型肝炎聚合酶蛋白(HBV—P01),并用镍基颗粒队蛋白粗提物进行部分纯化。方法将全长HBV—Pol基因用PCR方法扩增并连接到在酿酒酵母高效表达的质粒中。转化株于30℃培养3d后进行诱导表达16h,4℃下收集蛋白粗提物并用镍基颗粒进行提纯。用免疫印迹技术检测表达结果。结果重组的HBV—Pol存在于该型酵母的蛋白粗提物中,该蛋白产物可被Nickel—particle提取。结论本研究为实现HBV—Pol在S.c.中的高水平表达提供了可靠依据,也便于HBV—Pol的生化特性研究以及蛋白纯
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