【摘 要】
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目的探讨c-Myc在骨髓基质细胞介导的急性髓细胞白血病(AML)细胞系耐药中的作用,从肿瘤微环境的角度探索AML耐药的分子机制。方法将AML细胞系U937、KG1a与造血干细胞移植健康供者的骨髓基质细胞(间充质干细胞,MSC)共培养,以细胞单独培养作为对照。流式细胞术及膜联蛋V(Annexin V)/碘化丙啶(PI)双染色法和DAPI染色法比较两种培养条件下AML细胞对米托蒽醌诱导的凋亡的差异;W
【机 构】
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300060天津医科大学附属肿瘤医院血液科天津市肿瘤防治重点实验室,300060天津医科大学附属肿瘤医院血液科天津市肿瘤防治重点实验室,300060天津医科大学附属肿瘤医院血液科天津市肿瘤防治重点实验
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目的探讨c-Myc在骨髓基质细胞介导的急性髓细胞白血病(AML)细胞系耐药中的作用,从肿瘤微环境的角度探索AML耐药的分子机制。
方法将AML细胞系U937、KG1a与造血干细胞移植健康供者的骨髓基质细胞(间充质干细胞,MSC)共培养,以细胞单独培养作为对照。流式细胞术及膜联蛋V(Annexin V)/碘化丙啶(PI)双染色法和DAPI染色法比较两种培养条件下AML细胞对米托蒽醌诱导的凋亡的差异;Western印迹检测两种培养条件下AML细胞c-Myc蛋白的表达;在培养体系中加入c-Myc抑制剂10058-F4,检测AML细胞对米托蒽醌诱导的凋亡的变化。
结果U937、KG1a两种AML细胞系与MSC共培养后,对米托蒽醌诱导的凋亡均低于对照组(9.88%±1.53%比42.83%±2.03%,P=0.004;20.60%±2.87%比42.53%±5.29%,P=0.030),共培养促进了AML细胞对化疗药物的耐药性。AML细胞系与MSC共培养后,Western印迹检测c-Myc蛋白的表达明显高于对照组。c-Myc抑制剂10058-F4可诱导AML细胞的凋亡;10058-F4加入共培养体系后,KG1a细胞系对米托蒽醌诱导的凋亡率从23.87%±1.55%显著升高到57.23%±3.88%(P=0.009),在U937细胞共培养体系中同样观察到细胞凋亡率从16.07%±2.11%显著提高到53.47%±4.08%(P=0.004),从而克服耐药。
结论AML细胞与MSC共培养可导致c-Myc蛋白表达的上调,从而介导AML细胞对化疗药物的耐药;针对c-Myc的靶向治疗将为AML的治疗提供新思路。
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