【摘 要】
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应用PCR方法扩增了新型鹅细小病毒(NGPV)的VP3基因,然后将其克隆到原核表达载体中,获得重组质粒pGEX-VP3。将pGEX-VP3转化到DH5α感受态细胞中,诱导表达后分别用SDS-PAGE和We
【机 构】
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南京出入境检验检疫局,东营市正邦养殖有限公司
【基金项目】
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江苏出入境检验检疫局科技计划项目计划,编号:2017KJ39
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应用PCR方法扩增了新型鹅细小病毒(NGPV)的VP3基因,然后将其克隆到原核表达载体中,获得重组质粒pGEX-VP3。将pGEX-VP3转化到DH5α感受态细胞中,诱导表达后分别用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行分析和鉴定。然后以表达的VP3蛋白作为抗原,包被ELISA板。分别对包被抗原的浓度、抗原封闭条件、血清的孵育条件、酶标二抗的孵育条件等进行优化,最终成功建立间接ELISA。VP3蛋白的包被稀释度为1:800,4℃包被过夜,5%脱脂乳4℃封闭过夜,血清稀释度为1:120,酶
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