shRNA真核表达质粒介导的RNA干扰对人结肠癌LoVo细胞mTOR基因表达的抑制作用

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目的探讨shRNA真核表达质粒介导的RNA干扰技术对人结肠癌LoVo细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因表达的抑制作用。方法合成编码shRNA的特异性DNA序列,连接到质粒pGenesil-1,采用脂质体Lipofectamine^TM 2000转染LoVo细胞,G418筛选4周。根据转染质粒的不同,实验分为3组:A组(正常对照组)为未转染的正常培养LoVo细胞,B组(阴性对照组)为转染pGenesil-1空载体质粒,C组(阳性实验组)为转染质粒pGenesil-1-mTOR。采用逆转录聚合酶链反应
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