论文部分内容阅读
摘 要：为了了解掌握甘肃省猪口蹄疫的感染分布情况以及O型口蹄疫的抗体水平，2009～2012年对全省14个州市定期采集样品，并进行O型口蹄疫抗体水平、非结构蛋白抗体ELISA以及RT-PCR的检测。结果表明：2009～2012年O型口蹄疫免疫合格率分别为：2009年72.8 %、2010年78.38 %、2011年75.7 %、2012年82.05 %。病原学RT-PCR检测未见阳性；非结构蛋白抗体ELISA检测结果表明：2009、2010、2011、2012年口蹄疫非结构蛋白抗体阳性率分别为5.24 %、3.67 %、3.42 %、3.95 %、四年平均阳性率3.89 %；规模场、散养户、屠宰场口蹄疫非结构蛋白抗体阳性率分别为：3.22 %、2.90 %、0。
关键词：猪口蹄疫；抗体水平监测；病原学监测
中图分类号：S851.31 文献标识码：C 文章编号：1001-0769（2014）04-0057-02
1 材料和方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验动物
定期在规模场、散养户、屠宰场采集血清样品，在屠宰场采集心、肝、脾、肾、淋巴结、扁桃体等内脏样品组织，发生疫情时在发病地点采集病料，送实验室进行病原检测。
1.1.2 试剂
O型口蹄疫正向间接血凝试验抗原及标准血清、非结构蛋白抗体3abc ELISA试剂盒购自中国农业科学院兰州兽医研究所；口蹄疫RT-PCR检测试剂盒购自北京世纪元亨公司。
1.1.3 主要仪器
生化培养箱、生物安全柜、可调式电动移液器、酶标分析仪、不锈钢手提式压力蒸汽灭菌器、自动洗板机等。
2 试验方法
参照口蹄疫诊断技术（GB/T18935-2003），并结合试剂盒说明书使用以下方法对所采集病料进行实验室检测。
① O型口蹄疫正向间接血凝试验；
② 非结构蛋白抗体ELISA3ABC试验；
③ 口蹄疫RT-PCR试验。
3 试验结果
3.1 正向间接血凝
利用正向间接血凝对2009～2012年所采集的样品进行O性口蹄疫抗体水平检测，检测结果大于等于1∶32判定为阳性合格，结果见表1
3.2 口蹄疫非结构蛋白抗体ELISA方法、RT-PCR方法
利用口蹄疫非结构蛋白抗体ELISA方法、RT-PCR方法对2009～2012年全省猪口蹄疫感染情况进行实验室检测，结果见表2、3。
4 讨论与分析
4.1 O型口蹄疫防控的最大困难
O型口蹄疫阳性样品在甘肃不同地域、猪群、养殖方式中普遍存在，且感染地域广泛，这是该病防控的最大困难。预示着O型口蹄疫随时可能发生，因而该病的威胁实际上非常大，但由于病原的大面积污染，使得净化难度非常大。
4.2 不同的地域间差别巨大
全省480个规模场，1946个散养户，104个屠宰场猪口蹄疫RT-PCR检测未见阳性；非结构蛋白抗体ELISA检测结果表明：2009、2010、2011、2012年口蹄疫非结构蛋白抗体阳性率分别为5.24 %、3.67 %、3.42 %、3.95 %、四年平均阳性率 3.89 %；规模场、散养户、屠宰场口蹄疫非结构蛋白抗体阳性率分别为：3.22 %、2.90 %、0；各市州口蹄疫非结构蛋白抗体阳性率0 %～12.93 %。 可见，2009～2012年在规模、散养猪群中都有口蹄疫非结构蛋白抗体阳性猪，而且不同的地域间差别很大。
4.3 病原广为散播的原因
一是重养轻防的人为因素。当前甘肃省个别扶贫、民政、甚至兽医部门和规模养殖场主的疫病防制意识比较淡薄，重养轻防，只抓引种、饲养和销售，一味扩大生产规模却不重视疫病防制；很多小型规模猪场没有专职兽医。这都是管理者防病意识淡薄，认识不足的表现，因而不能给疫病防制给予足够的重视。二是生猪的市场交易混乱等社会环境因素。在市场管理和检疫制度执行不彻底的情况下，也给畜禽疫病防制带来了一定的负面影响。三是国家免疫预防为主的防疫政策中，对猪群发生疫情时，虽有补助，但补助较少，还不及时，造成养殖户上报疫情的积极性降低，有隐瞒发病猪群的可能。四是规模化猪场的管理欠缺，如：免疫程序不科学，消毒工作不规范、不彻底，没有严格的种源净化措施，环境污染和有害生物的控制滞后等。五是兽医防制技术方面的因素，如生猪的病原检测方法，在猪瘟、蓝耳病等的净化中，对活体的采样以及检测方法的敏感性，都需要进一步改进。
关键词：猪口蹄疫；抗体水平监测；病原学监测
中图分类号：S851.31 文献标识码：C 文章编号：1001-0769（2014）04-0057-02
1 材料和方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验动物
定期在规模场、散养户、屠宰场采集血清样品，在屠宰场采集心、肝、脾、肾、淋巴结、扁桃体等内脏样品组织，发生疫情时在发病地点采集病料，送实验室进行病原检测。
1.1.2 试剂
O型口蹄疫正向间接血凝试验抗原及标准血清、非结构蛋白抗体3abc ELISA试剂盒购自中国农业科学院兰州兽医研究所；口蹄疫RT-PCR检测试剂盒购自北京世纪元亨公司。
1.1.3 主要仪器
生化培养箱、生物安全柜、可调式电动移液器、酶标分析仪、不锈钢手提式压力蒸汽灭菌器、自动洗板机等。
2 试验方法
参照口蹄疫诊断技术（GB/T18935-2003），并结合试剂盒说明书使用以下方法对所采集病料进行实验室检测。
① O型口蹄疫正向间接血凝试验；
② 非结构蛋白抗体ELISA3ABC试验；
③ 口蹄疫RT-PCR试验。
3 试验结果
3.1 正向间接血凝
利用正向间接血凝对2009～2012年所采集的样品进行O性口蹄疫抗体水平检测，检测结果大于等于1∶32判定为阳性合格，结果见表1
3.2 口蹄疫非结构蛋白抗体ELISA方法、RT-PCR方法
利用口蹄疫非结构蛋白抗体ELISA方法、RT-PCR方法对2009～2012年全省猪口蹄疫感染情况进行实验室检测，结果见表2、3。
4 讨论与分析
4.1 O型口蹄疫防控的最大困难
O型口蹄疫阳性样品在甘肃不同地域、猪群、养殖方式中普遍存在，且感染地域广泛，这是该病防控的最大困难。预示着O型口蹄疫随时可能发生，因而该病的威胁实际上非常大，但由于病原的大面积污染，使得净化难度非常大。
4.2 不同的地域间差别巨大
全省480个规模场，1946个散养户，104个屠宰场猪口蹄疫RT-PCR检测未见阳性；非结构蛋白抗体ELISA检测结果表明：2009、2010、2011、2012年口蹄疫非结构蛋白抗体阳性率分别为5.24 %、3.67 %、3.42 %、3.95 %、四年平均阳性率 3.89 %；规模场、散养户、屠宰场口蹄疫非结构蛋白抗体阳性率分别为：3.22 %、2.90 %、0；各市州口蹄疫非结构蛋白抗体阳性率0 %～12.93 %。 可见，2009～2012年在规模、散养猪群中都有口蹄疫非结构蛋白抗体阳性猪，而且不同的地域间差别很大。
4.3 病原广为散播的原因
一是重养轻防的人为因素。当前甘肃省个别扶贫、民政、甚至兽医部门和规模养殖场主的疫病防制意识比较淡薄，重养轻防，只抓引种、饲养和销售，一味扩大生产规模却不重视疫病防制；很多小型规模猪场没有专职兽医。这都是管理者防病意识淡薄，认识不足的表现，因而不能给疫病防制给予足够的重视。二是生猪的市场交易混乱等社会环境因素。在市场管理和检疫制度执行不彻底的情况下，也给畜禽疫病防制带来了一定的负面影响。三是国家免疫预防为主的防疫政策中，对猪群发生疫情时，虽有补助，但补助较少，还不及时，造成养殖户上报疫情的积极性降低，有隐瞒发病猪群的可能。四是规模化猪场的管理欠缺，如：免疫程序不科学，消毒工作不规范、不彻底，没有严格的种源净化措施，环境污染和有害生物的控制滞后等。五是兽医防制技术方面的因素，如生猪的病原检测方法，在猪瘟、蓝耳病等的净化中，对活体的采样以及检测方法的敏感性，都需要进一步改进。