【摘 要】
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目的 探讨WNT5A基因过表达与颗粒细胞胰岛素抵抗发生的相关性.方法 选取3周龄(n=15只)和6周龄(n=16只)雌性昆明小鼠,采用免疫组织化学和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检
【机 构】
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山东大学生殖医学研究中心(山东大学附属生殖医院) 生殖内分泌教育部重点实验室山东省生殖医学重点实验室 国家辅助生殖与优生工程技术研究中心,山东 济南250012
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目的 探讨WNT5A基因过表达与颗粒细胞胰岛素抵抗发生的相关性.方法 选取3周龄(n=15只)和6周龄(n=16只)雌性昆明小鼠,采用免疫组织化学和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Wnt5a在小鼠卵巢颗粒细胞中的表达特征;通过Forskolin+pma模拟促黄体生成素(LH)峰处理人的卵巢颗粒细胞系24 h,检测LH峰作用后颗粒细胞的WNT5A表达对胰岛素反应性的影响;利用p-EGFP-N1-WNT5A转染KGN细胞系,检测过表达WNT5A与颗粒细胞胰岛素抵抗发生的相关性.结果 与动情前期相比,Wnt5a在6周小鼠动情期(n=3,F=8.874,P=0.017)和动情后期(n=3,F=8.874,P=0.001)的卵巢中mRNA转录水平升高,在成熟卵泡颗粒细胞中蛋白表达水平升高.与未促排卵处理相比,促排卵处理可促进卵巢颗粒细胞Wnt5a mRNA转录水平升高(n=3,F=12.093,P=0.003),抑制KGN细胞的胰岛素反应性,而WNT5A则改善其胰岛素反应性.与转染质粒空载处理相比,过表达WNT5A导致胰岛素通路反应性降低,乳酸代谢降低(n=3,F=15.281,P<0.001).结论 卵巢排卵过程中WNT5A的表达水平升高,有利于增强颗粒细胞对胰岛素的反应性;而类似在多囊卵巢综合征(PCOS)患者中WNT5A表达异常升高时,可能会引起PCOS相关的胰岛素抵抗的发生.
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