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Shine-Dalgarno序列与起始密码子之间的距离与组成对凝乳酸原基因表达有明显的影响,可导致其表达水平有15倍之差。SD序列至ATG之间为15bp不利于表达,表达质粒中SD-ATG在7-11bP之间都有可能获得高效表达;但决定因素不是简单的长度,而是RBS附近可能的二级结构即△G的大小、SD序列及ATG中参与配对的碱基数目。将pTLC23中凝乳酶原cDNA3＇端非翻译区插入终止密码子TGA与转录终止子rrnBT_1T_2之间适当位置可提高凝乳酶原基因的表达,这可能是因为这段序列能形成由53个碱基对和