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目的 构建β-eatenin真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位.方法 提取工具细胞NIH3T3的mRNA,反转录为cDNA.PCR扩增β-catenin基因cDNA全长,并将其亚克隆至pEGFP-C1表达载体中.进一步将构建的重组质粒进行酶切和测序鉴定,并转染到工具细胞NIH3T3细胞中,提取细胞蛋白进行Western blot检测.最后利用激光扫描共聚焦显微镜观察pEGFP-β-catenin在NIH3T3细胞内的定位.结果 β-catenin基因cDNA全长克隆到了真核表达载体pEGFP-C1中,酶切鉴定片段为2346 bp,并测序成功.Western blot检测到了GFP-β-catenin融合蛋白表达,分子量约为115kDa.pEGFP-p-catenin在工具细胞NIH3T3细胞中主要定位于细胞膜和细胞质.结论 成功构建了β-catenin基因cDNA全长的真核表达载体,pEGFP-β-catenin蛋白在NIH3T3细胞中主要定位于细胞膜和细胞质.