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目的：在大肠杆菌中高效表达人ｌｅｐｔｉｎ。方法：根据中国人肥胖基因（ｏｂｅｓｅｇｅｎｅ，ＯＢ）ｃＤＮＡ序列和高效表达质粒ｐＢＶ２２１的多克隆位点，设计ＰＣＲ引物，以含有人ＯＢ的重组质粒ｐＵＣ１９ＯＢ为模板，体外扩增人ＯＢ编码ｌｅｐｔｉｎ的片段（ＯＢ１），并经内切酶消化鉴定。将带有一对限制性内切酶位点的ＯＢ１和ｐＢＶ２２１分别进行双酶切，然后把ＯＢ１定向克隆于ｐＢＶ２２１中。结果：成功地构建了重组质粒ｐＢＶ２２１ＯＢ１，实现了人ｌｅｐｔｉｎ在大肠杆菌中的表达。结论：采用定向克隆技术，将ＯＢ１插入表达质粒ｐＢＶ２２１，连接效率高，且重组质粒中ＯＢ１均为正向插入，确保了人肥胖基因在大肠杆菌中的表达。