HBsAg真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达

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目的构建HBsAg真核表达载体,转染CHO细胞并检测其表达。方法通过PCR法扩增出乙肝表面抗原的S基因和dhfr基因,分别克隆到T载体上,然后分别将S基因和dhfr基因克隆到pCI载体上,将pcI载体的CMV启动子替换为bEF-la启动子。对新构建的pEF1α-S-dlffr真核表达载体进行酶切和测序鉴定。用脂质体法转染CHO(dhfr-)细胞,并用ELISA法检测HBsAg表达。结果hEF-1α启动子、S基因和dhfr基因经测序与Genbank报道一致。真核表达载体pEF1α—S-dhfr经酶切鉴定与预
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