猪肝酯酶在甲醇酵母中的克隆与表达

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猪肝酯酶(Pig Liver Esterase,PLE)是手性合成工业中最常用的三种生物催化剂之一,它的生化提取物是多种同工酶(α、β和γ亚基)的混合物,而它的单一组分(7亚基)有很高的手性拆分活性。为获得重组PLE,从猪肝提取总RNA,经RT—PCR得到γ亚基目的基因,并利用pPIC9K质粒构建成pPIC9K—PLE表达载体,转化到Pichia pastoris中,转化细胞株摇瓶发酵表达重组PLE达450mg/L.活性染色证明分子量略低于天然酶。
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