【摘 要】
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目的 优化小鼠大脑乙酰胆碱酯酶(AChE)提取、测定方法,评价异喹啉类生物碱的AChE抑制活性.方法 采用蔗糖密度梯度离心及Ellman法评价不同提取方法对小鼠大脑AChE亚型表达及提取影响,优化测定方法,并在此基础上对异喹啉类生物碱的AChE抑制活性及构效关系进行考察.结果 匀浆+超声、匀浆提取法对大脑AChE亚型表达一致,但前者AChE提取效果较优.随着反应温度、显色时间增加,药物AChE抑制活性增强,但显色时间超过30 min时,药物AChE抑制活性趋于平缓.随着大脑裂解液稀释倍数增加,药物AChE
【机 构】
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香港科技大学深圳研究院,深圳市可食用及药用资源研究重点实验室,广东深圳518057;山西中医药大学,中药与食品工程学院,王世民国医大师工作室,山西晋中030619;香港科技大学深圳研究院,深圳市可食用
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目的 优化小鼠大脑乙酰胆碱酯酶(AChE)提取、测定方法,评价异喹啉类生物碱的AChE抑制活性.方法 采用蔗糖密度梯度离心及Ellman法评价不同提取方法对小鼠大脑AChE亚型表达及提取影响,优化测定方法,并在此基础上对异喹啉类生物碱的AChE抑制活性及构效关系进行考察.结果 匀浆+超声、匀浆提取法对大脑AChE亚型表达一致,但前者AChE提取效果较优.随着反应温度、显色时间增加,药物AChE抑制活性增强,但显色时间超过30 min时,药物AChE抑制活性趋于平缓.随着大脑裂解液稀释倍数增加,药物AChE抑制活性未明显变化,且稀释10～20倍时,空白组AChE吸光度值为0.6～1.5.异喹啉类生物碱具有较好AChE抑制活性,而叔胺型生物碱AChE抑制活性降低.结论 匀浆联合超声对小鼠大脑AChE有较好提取效果;反应温度37℃,显色时间30 min,大脑裂解液稀释10～20倍时,药物AChE抑制活性灵敏度、准确性好.异喹啉类生物碱的AChE抑制活性与其季胺型结构密切相关.
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