【摘 要】
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目的 观察阻抑胚胎发育相关信号通路Sonic hedgehog(Shh)对人肝癌细胞系Hep-3B增殖和凋亡的影响.方法 将实验细胞分为转染组、隐性对照组和空白对照组.设计针对Shh信号通路中Smo基因的siRNA,通过Lipedectemin2000将其转染进Hep-3B细胞株,噻唑蓝(Mar)比色法检测沉默Smo基因后第0、8、16、24和48 h的细胞数和MTr的D(入)值;流式细胞术检测沉
【机 构】
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256603,山东滨州医学院附属医院肝胆外科,胜利油田滨南医院检验科,滨州医学院解削学教研室,中山大学附属第一医院肝胆外科
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目的 观察阻抑胚胎发育相关信号通路Sonic hedgehog(Shh)对人肝癌细胞系Hep-3B增殖和凋亡的影响.方法 将实验细胞分为转染组、隐性对照组和空白对照组.设计针对Shh信号通路中Smo基因的siRNA,通过Lipedectemin2000将其转染进Hep-3B细胞株,噻唑蓝(Mar)比色法检测沉默Smo基因后第0、8、16、24和48 h的细胞数和MTr的D(入)值;流式细胞术检测沉默Smo基因48 h细胞凋亡.结果 转染组与空白对照组比较,加入siRNA后,8 h时细胞增殖数无明显减少,16、24和48 h时细胞数明显减少(P<0.01),24和48 h时细胞存活率差异有统计学意义.阴性对照组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);Hep-3B细胞经siRNA作用48 h后,可见亚二倍体核型峰-凋亡峰.其中,转染组凋亡率为30%,阴性对照组与空白对照组未见凋亡峰.结论 Shh信号分子对肝细胞癌的增殖起维持作用;通过特异性阻断该信号通路,可以抑制肝癌细胞增殖,并促进细胞凋亡。
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