【摘 要】
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目的观察高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞小泛素相关修饰物(SUMO)2/3和Smad4蛋白的表达及二者之间的相互作用,探讨SUMO化修饰在糖尿病肾病转化生长因子-β(TGF-β)信号通路中的
【机 构】
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泸州医学院附属医院内分泌科,巴中市中心医院内分泌科,
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目的观察高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞小泛素相关修饰物(SUMO)2/3和Smad4蛋白的表达及二者之间的相互作用,探讨SUMO化修饰在糖尿病肾病转化生长因子-β(TGF-β)信号通路中的作用与机制。方法将体外培养的大鼠肾小球系膜细胞分别设正常对照组(5.6mmol/L葡萄糖),高糖组(10、20、30mmol/L葡萄糖),渗透压对照组(5.6mmol/L葡萄糖+24.4mmol/L甘露醇)。用Western blot检测各组细胞SUMO2/3和Smad4蛋白表达;RT-PCR检测SUMO2/3和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)mRNA表达;免疫共沉淀方法检测SUMO2/3与Smad4蛋白间的相互作用;免疫荧光双染技术检测SUMO2/3与Smad4在细胞中的共定位关系。结果与正常对照组比较,各高糖组SUMO2/3、Smad4蛋白及SUMO2/3、FN mRNA表达均增加(P<0.05);免疫共沉淀结果显示SUMO2/3与Smad4在各组均存在相互作用,并在高糖刺激下显著增强(P<0.05);免疫荧光双染结果表明SUMO2/3与Smad4在肾小球系膜细胞内存在共定位现象,且在高糖组更明显。结论 SUMO2/3可能通过共价修饰Smad4参与糖尿病肾病时TGF-β信号通路的调控。
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