【摘 要】
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目的体外构建人神经生长因子-4（neurotrophin-4,NT-4）与质粒载体pEGFP-N1（卡那霉素抗性）的重组体,为后续的转基因移植治疗脊髓损伤创造条件.方法用Trizol法提取人胎脑组织总RNA,
【机 构】
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昆明医学院神经科学研究所,成都军区昆明总医院神经外科,中国科学院昆明动物研究所
【基金项目】
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云南省教育厅科研基金重点项目（07C10388）
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目的体外构建人神经生长因子-4（neurotrophin-4,NT-4）与质粒载体pEGFP-N1（卡那霉素抗性）的重组体,为后续的转基因移植治疗脊髓损伤创造条件.方法用Trizol法提取人胎脑组织总RNA,经RT-PCR扩增,EorRⅠ和BamHⅠ核酸内切酶酶切电泳纯化获得人神经营养因子-4（NT-4）DNA.用含质粒载体pEGFP-N1DNA的大肠杆菌接种经划板,挑选菌落、振荡培养,并用碱裂解法提取质粒载体pEGFP-N1DNA,经酶切、电泳纯化后,通过连接、转化感受态细胞,DNA小量提取法获得NT-
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