改良骨骼肌肌纤维分型ATP酶染色方法

来源 :西安交通大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:pyw520
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目的采用经作者改良的Guth-Samaha肌球蛋白ATP酶染色方法,观察其对大鼠骨骼肌肌纤维分型染色效果。方法取8μm厚度SD大鼠胸肌及肱二头肌冰冻切片,用含40 g/L多聚甲醛固定液固定5 min;Tris洗液漂洗后置预孵育液中室温下孵育15 min;Tris洗液中漂洗2次,置孵育液中于37℃恒温水浴摇床中振摇孵育60 min;10 g/L氯化钙洗3次后置20 g/L氯化钴液中3 min;蒸馏水冲洗,于10 g/L硫化铵液中孵育3 min;自来水冲洗3 min,常规梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片,置显微镜下观察。结果SD大鼠胸肌和肱二头肌经改良Guth-Samaha肌球蛋白ATP酶染色后均可清晰地显示出明亮色白的Ⅰ型纤维和幽暗深褐的Ⅱ型纤维。结论改良Guth-Samaha肌球蛋白ATP酶染色方法具有试剂配制简单、操作简化和肌纤维分型效果满意等优点,值得在骨骼肌相关研究中借鉴应用。
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