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目的 探讨微小RNA（miRNA）-21对动脉粥样硬化（AS）内皮细胞炎症反应的影响及其分子生物学机制。方法 本实验时间为2021年7月至2022年10月。（1）动物实验。将3只ApoE-/-小鼠纳入AS组，给予高脂饲料饲养以构建AS模型；将3只C57BL/6小鼠纳入对照组，给予标准饲料饲养。采用RT-qPCR检测AS组和对照组小鼠miRNA-21及IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量。（2）细胞实验。（1）将人脐静脉内皮细胞（HUVECs）分为模拟物组、模拟物对照组、抑制剂组和抑制剂对照组，分别转染miRNA-21模拟物、模拟物阴性对照、miRNA-21抑制剂、抑制剂阴性对照，转染48 h后构建AS细胞模型。采用RT-qPCR检测各组miRNA-21及IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量。（2）通过miRNA靶基因数据库TargetScan在线进行生物信息学分析。（3）构建SPRY1野生型质粒（SPRY1-WT 3’-UTR）和SPRY1突变型质粒（SPRY1-MUT 3’-UTR）。将HUVECs分为SPRY1-WT 3’-UTR模拟物组、SPRY1-WT 3’-UTR模拟物对照组、SPRY1-MUT 3’-UTR模拟物组、SPRY1-MUT 3’-UTR模拟物对照组，分别转染SPRY1-WT 3’-UTR和miRNA-21模拟物、SPRY1-WT 3’-UTR和模拟物阴性对照、SPRY1-MUT 3’-UTR和miRNA-21模拟物、SPRY1-MUT 3’-UTR和模拟物阴性对照，转染48 h后采用双荧光素酶报告基因实验检测其荧光素酶活性。（4）将HUVECs分为模拟物组和模拟物对照组，分别转染miRNA-21模拟物、模拟物阴性对照，转染48 h后构建AS细胞模型。采用RT-qPCR检测各组SPRY1 mRNA相对表达量。（5）将HUVECs分为模拟物+Vector组、模拟物+pcDNA-SPRY1组，分别转染miRNA-21模拟物和Vector、miRNA-21模拟物和pcDNA-SPRY1，转染48 h后构建AS细胞模型。采用RT-qPCR检测各组IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量。（6）将HUVECs分为模拟物组、模拟物对照组、模拟物+Vector组、模拟物+pcDNA-SPRY1组，分别转染miRNA-21模拟物、模拟物阴性对照、miRNA-21模拟物和Vector、miRNA-21模拟物和pcDNA-SPRY1，转染48 h后构建AS细胞模型。采用Western blot法检测各组SPRY1、磷酸化细胞外调节蛋白激酶（ERK）1/2、磷酸化NF-κB蛋白。（7）将HUVECs分为模拟物对照组、模拟物组、模拟物+U0126组，分别转染模拟物阴性对照（模拟物对照组）、miRNA-21模拟物（模拟物组和模拟物+U0126组），在此基础上模拟物+U0126组使用ERK1/2抑制剂U0126进行处理，转染48 h后均构建AS细胞模型。采用RT-qPCR检测各组IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量。采用Western blot法检测各组磷酸化ERK1/2、磷酸化NF-κB蛋白。结果 （1）动物实验结果：AS组小鼠miR-21及IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量高于对照组（P＜0.05）。（2）细胞实验结果：（1）模拟物组miRNA-21及IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量高于模拟物对照组（P＜0.05）；抑制剂组miRNA-21及IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量低于抑制剂对照组（P＜0.05）。（2）生物信息学分析结果显示，SPRY1是miRNA-21的潜在靶基因。（3）双荧光素酶报告基因实验结果显示，SPRY1-WT 3’-UTR模拟物组荧光素酶活性低于SPRY1-WT 3’-UTR模拟物对照组（P＜0.05）;SPRY1-MUT 3’-UTR模拟物组与SPRY1-MUT 3’-UTR模拟物对照组荧光素酶活性比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。（4）模拟物组SPRY1 mRNA相对表达量低于模拟物对照组（P＜0.05）。（5）模拟物+pcDNA-SPRY1组IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量低于模拟物+Vector组（P＜0.05）。（6）模拟物组SPRY1蛋白低于模拟物对照组，磷酸化ERK1/2、磷酸化NF-κB蛋白高于模拟物对照组（P＜0.05）；模拟物+pcDNA-SPRY1组SPRY1蛋白高于模拟物+Vector组，磷酸化ERK1/2、磷酸化NF-κB蛋白低于模拟物+Vector组（P＜0.05）。（7）模拟物+U0126组IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量及磷酸化ERK1/2、磷酸化NF-κB蛋白低于模拟物组（P＜0.05）。结论 动物实验表明，AS小鼠存在miRNA-21过表达和炎症反应；细胞实验表明，miRNA-21过表达可降低SPRY1，抑制ERK/NF-κB信号通路，进而促进AS内皮细胞炎症反应，故miRNA-21可能是治疗AS的新型分子靶点。