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以电子设计用于猪的多位点基因打靶的人工锌指核酸酶为例，探索如何电子设计优化理想的人工锌指核酸酶，以减少人工锌指核酸酶的毒性。采用OPEN电子设计方法，生物信息学方法的预测分析ZFP的立体结构，设计优化合适的连接体和间隔体组合，并通过突变优化FokⅠ异源二聚体。采用OPEN法设计三指ZF序列，并连接为ZFP序列，设计出长度为6bp且富含AT碱基的spacer，加上长度为4个氨基酸残基的inter－domain linker，连接FokI切割结构域双突变子异源二聚体，并通过各种软件工具对ZFN的空间结构进行模