【摘 要】
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目的观察雷帕霉素对人骨肉瘤细胞株MG-63增殖、周期及Cyclin D1基因表达的影响,探讨雷帕霉素抑制骨肉瘤细胞周期的可能机制。方法体外培养骨肉瘤MG-63细胞,用不同浓度的雷帕
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科,
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目的观察雷帕霉素对人骨肉瘤细胞株MG-63增殖、周期及Cyclin D1基因表达的影响,探讨雷帕霉素抑制骨肉瘤细胞周期的可能机制。方法体外培养骨肉瘤MG-63细胞,用不同浓度的雷帕霉素(1、10、25nmol/L)干预MG-63细胞。采用水溶性四唑盐WST-8比色法检测MG-63细胞增殖的变化;流式细胞仪检测MG-63细胞周期;RT-PCR及免疫细胞化学SABC法检测MG-63细胞Cyclin D1基因表达的变化。结果雷帕霉素能显著抑制MG-63细胞增殖,呈时间依赖性,差别有显著性意义(P<0.05);流式细胞分析显示雷帕霉素能显著抑制细胞周期,使G0/G1期细胞增多(P<0.05);RT-PCR检测显示雷帕霉素对MG-63细胞Cyclin D1mRNA表达无明显影响(P>0.05);免疫细胞化学分析雷帕霉素能显著抑制Cyclin D1蛋白的表达,差别有显著性意义(P<0.05)。结论雷帕霉素能下调MG-63细胞Cyclin D1蛋白的表达,抑制MG-63细胞增殖及细胞周期。
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