构建TA载体快速克隆PCR产物

来源 :皖南医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bigrobbin
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目的 为了快速克隆PCR产物,本实验构建了简单、方便的TA载体。方法 pBluescript SK(-)经EcoR V酶切形成平端切口,在TaqE的催化下加一个dTMP形成3'端带有T的粘端载体,在T4DNA连接酶作用下,将PCR产物互补连接于TA载体上,重组质粒转化细菌、破裂解法提取重组质粒DNA,酶切及电泳鉴定。结果 TA载体成功地克隆了PCR产物。结论 构建的TA载体简单、方便、可以克隆任何PCR产物。
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