【摘 要】
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目的 探讨脉冲强磁场对体外新生大鼠神经干细胞(NSCs)向神经元方向分化的作用.方法 体外分离培养新生3d内的SD大鼠脑室下区的NCSs,无血清培养14d后,随机分为实验组和对照组.实验组置于脉冲强磁场条件下用前期探索的促增殖参数(0.1 Hz、4T、8次)进行干预,每次脉冲放电20 ms.对照组置于相同条件下但不做干预处理.干预后第1天,采用10％胎牛血清诱导贴壁分化,显微镜下观察不同时间段细胞
【机 构】
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430030武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院康复科,430030武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院康复科,430030武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科,湖北省宜昌市第一人民医
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目的 探讨脉冲强磁场对体外新生大鼠神经干细胞(NSCs)向神经元方向分化的作用.方法 体外分离培养新生3d内的SD大鼠脑室下区的NCSs,无血清培养14d后,随机分为实验组和对照组.实验组置于脉冲强磁场条件下用前期探索的促增殖参数(0.1 Hz、4T、8次)进行干预,每次脉冲放电20 ms.对照组置于相同条件下但不做干预处理.干预后第1天,采用10％胎牛血清诱导贴壁分化,显微镜下观察不同时间段细胞形态学变化;贴壁分化后第7天,通过免疫荧光染色、蛋白免疫印迹法(Western Blot)及实时定量聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测NCSs分化后第7天神经元βⅢ微管蛋白(TUJ1)及星形胶质细胞相关特异性标志神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果 干预后,免疫荧光染色示实验组TUJ1阳性细胞数为(33.4±5.1)％,较对照组[(26.5 ±7.0)％]明显增多(P＜0.05),实验组的GFAP阳性细胞率[(23.9±5.0)％]较对照组[(36.2±2.2)％]明显减少(P＜0.05).RT-PCR检测显示,实验组TUJ1的mRNA表达量是对照组的(1.682 ±0.086)倍,GFAP的mRNA相对表达量是对照组的(0.590±0.157)倍,且组间差异有统计学意义(P＜0.05).Western Blot检测结果与RT-PCR检测一致,实验组TUJ1蛋白表达较对照组增多,GFAP蛋白表达较对照组减少.结论 脉冲强磁场具有促进NCSs向神经元分化,并抑制其向星形胶质细胞分化的作用。
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