【摘 要】
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目的通过对乳鼠心肌细胞原代培养及纯化方法的优化探索,寻找简单、有效的培养及纯化方法。方法 20只乳鼠随机分两组,A组采用酶消化法+吸管吹打获取心肌细胞;B组通过酶消化法+
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目的通过对乳鼠心肌细胞原代培养及纯化方法的优化探索,寻找简单、有效的培养及纯化方法。方法 20只乳鼠随机分两组,A组采用酶消化法+吸管吹打获取心肌细胞;B组通过酶消化法+自制转子磁力搅拌获取心肌细胞。两组均采用差速贴壁和5-溴脱氧尿核苷(BrdU)纯化心肌细胞,免疫荧光法鉴定心肌细胞纯度,台盼蓝染色观察心肌细胞活性,显微镜下计数心肌细胞搏动性。结果 A组心肌细胞的存活率、搏动率、纯度分别为(89.90±2.92)%、(91.30±2.00)%和(94.90±1.79)%;B组分别为(94.70±2.31)%、(95.00±1.24)%和(95.60±1.43)%。B组心肌细胞活性及搏动率均高于A组,差异有统计学意义(P>0.05);B组的心肌细胞纯度稍高于A组,但差异无统计学意义(P>0.05)。BrdU加入后与未加入相比,抑制成纤维细胞的生长。结论酶消化法+自制转子磁力搅拌更优于酶消化法+吸管吹打,可以有效获取心肌细胞,BrdU有利于心肌细胞的纯化。
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