【摘 要】
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AGPase(腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶)是植物内淀粉合成的限速酶。sAGP基因编码AGPase的小亚基。本研究使用同源克隆法,以NCBI中已知马铃薯sAGP基因(Gen Bank:AY186620.1)序列
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31501322);四川省博士后特别资助项目(03130104);留学回国人员科技活动择优资助项目(00124300)共同资助
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AGPase(腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶)是植物内淀粉合成的限速酶。sAGP基因编码AGPase的小亚基。本研究使用同源克隆法,以NCBI中已知马铃薯sAGP基因(Gen Bank:AY186620.1)序列设计引物,克隆紫色马铃薯‘蓉紫芋5号’的AGPase小亚基基因sAGP的编码区序列。结果显示,克隆的序列与普通马铃薯一致性达99%,成功获得了紫色马铃薯的cDNA;该片段具有一个1 425 bp的开放阅读框,编码475个氨基酸残基;预测蛋白质分子量为52.43 kD,等电点为6.23。sAGP同源性分析表明紫色马铃薯与番茄、辣椒、烟草的同源性均达到90%以上。用氨基酸序列构建三维模型,发现克隆得到的sAGP包含10个α螺旋,25个β折叠,并存在NTP transferase domain与pbH1两个结构域,符合NTP转移酶家族特征,推测其为AGPase小亚基。本研究克隆了紫色马铃薯sAGP基因并对其序列特征进行了初步分析,为今后进一步了解研究紫色马铃薯中的淀粉合成机制提供了科学依据。
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